Freelite® est une avancée majeure pour la détection et le suivi du Myélome Multiple (MM) et des autres dyscrasies des cellules B. Les tests Freelite ont été développés par Binding Site pour doser les chaînes légères libres kappa et lambda des immunoglobulines. Notre expertise dans la fabrication d’anticorps nous a permis de fournir un test quantitatif, spécifique et automatisable pour le dosage des chaînes légères libres sériques.
Des preuves cliniques significatives confirment les avantages des tests de dosage des chaînes légères libres sériques Freelite® pour le suivi initial des gammapathies monoclonales, l’identification des amyloses AL et des patients souffrant de Myélome Multiple Non Sécrétant mal diagnostiqués par les méthodes éléctrophorétiques classiques, en tant qu’indicateur de pronostic pour la progression du myélome, la stratification du risque des patients atteints de MGUS, et en évaluation de l’efficacité du traitement.
Freelite® est un marqueur sensible spécifique des chaînes légères libres sériques kappa et lambda (CLL) du plasma. Il fournit une aide quantitative au dosage de :
- Kappa libre dans le sérum
- Lambda libre dans le sérum
- La rapport kappa libre/lambda libre sérique
Le rapport des chaînes légères libres sériques est un bon indicateur de la monoclonalité. Il est précieux pour faire la distinction entre les maladies monoclonales et les pathologies polyclonales.
En 2009, le Groupe de travail international sur le myélome a publié un guide recommandant la mesure des concentrations en chaînes légères libres sériques comme une aide dans le diagnostic, le pronostic et le suivi des patients atteints de myélome multiple.
Ce guide était fondé sur les résultats obtenus dans des essais cliniques extensifs en utilisant les tests polyclonaux Freelite®.1
Les principales recommandations sont:-
- Recommandations pour l’utilisation du test CLL sérique pour le Diagnostic
- Recommandations pour l’utilisation du test CLL sérique pour le pronostic
- Recommandations pour l’utilisation du test CLL sérique dans l’évaluation de la réponse
Un rapport récent publié par Katzmann et al2 recommande la simplification du protocole de diagnostic des dyscrasies plasmocytaires indiqué dans les recommandations de l’«International Myeloma Working Group». Il stipule qu’une électrophorèse sérique et qu’un dosage des chaînes légères libres (CLL) Freelite® peuvent suffire dans beaucoup de cas.
"...because of the small incremental sensitivity provided by urine studies and serum IFE, the use of PEL [SPE] plus FLC provides a simple and efficient initial diagnostic screen for the high-tumour-burden monoclonal gammopathies such as MM [multiple myeloma], WM and SMM [smouldering multiple myeloma]. Urine studies and serum IFE can be ordered more selectively."
Cliquer ici pour plus d’information sur Freelite®
Hevylite® (HLC)*, un nouveau test Binding Site maintenant disponible, promet de transformer la prise en charge des patients atteints de dyscrasies des cellules B, comme Freelite® l’a déjà fait.
Les tests Hevylite® offrent:
- Une meilleure sensibilité que l’électrophorèse des protéines sériques pour la quantification des immunoglobulines monoclonales
- Un résultat aussi voir plus sensible que l’immunofixation electrophorétique
- Une valeur clinique pour le suivi des patients avec des gammapathies monoclonales
- Les rapports HCL ont une plus grande gamme de mesure que les dosages des immunoglobulines monoclonales car l’immunoglobuline non tumorale permet l’évaluation de l’immunosupression
- Les rapports HLC ne sont pas affectés par les variations du volume sanguin, l’hématocrite et le métabolisme (par les récepteurs FcRn des IgG) qui affectent les autres tests des immunoglobulines sériques courants
- Un rapport HLC informatif sur le taux de destruction de la tumeur comparé au taux de destruction des plasmocytes non tumoraux. L’évaluation du niveau de destruction sélective peut aider dans la prise de décision quant au choix d’une chimiothérapie efficace.
Cliquer ici pour plus d’information sur Hevylite®
Qu’est-ce qu’Hevylite®
Qu’est-ce qu’Hevylite® |
Les molécules d’immunoglobulines entières contiennent des épitopes uniques de la région constante de jonction des chaînes lourdes et légères. Ils sont la cible des anticorps Hevylite®*. Ils peuvent identifier séparément les différents types de chaîne légère de chaque classe d’immunoglobuline c’est-à-dire IgGκ, IgGλ, IgAκ, IgAλ, IgMκ, IgMλ. Les molécules sont ensuite dosées par paires c’est-à-dire IgGκ/IgGλ afin de donner le rapport entre la concentration de l’immunoglobuline monoclonale impliquée/la concentration de l’immunoglobuline non impliquée, de la même façon que sont faits les rapports κ/λ des chaînes légères libres lors de l’utilisation de Freelite®. |
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Les épitopes cibles (en noir) des anticorps Hevylite® sont situés sur les régions constantes entre les chaînes lourdes et légères des immunoglobulines. |
Comme pour les tests Freelite®, les réactifs des tests Hevylite® sont des anticorps polyclonaux produits chez le mouton. Les techniques d’immunisation et d’adsorption ont été spécialement développées pour s’affranchir des réactions croisées. Ainsi, les réactifs IgGκ n’interagissent pas avec κ libre ou IgGλ, ou d’autres immunoglobulines.
Il y a 4 régions à épitopes Hévylite par molécule d’immunoglobuline - une sur chaque face des régions de contact chaîne lourde/chaîne légère et la même chose sur l’autre branche de la molécule. Grâce à ces 4 regions épitopes par molécule, les complexes immuns se forment rapidement avec les immunoglobulines du sérum du patient. Ceci est nécessaire pour la production d’immunotests homogènes compatibles pour une être utilisés sur les automates des laboratoire dont les techniques de mesure sont basée sur la néphélémétrie et la turbidimétrie.
Heavy chain / light chain pairs of IgG, IgA and IgM molecules showing the target epitopes for Hevylite® immunoassays in black.
Le protocole de tests analytiques typiques pour la présence de gammapathie monoclonale comprend une électrophorèse des protéines sériques (EPS) avec un scan densitométrique et/ou une immunofixation (IFE) avec dosage des chaînes légères libres. Bien que l’EPS soit un test simple, économique, il n’est pas vraiment sensible et rend la quantification de protéines à faibles concentrations (1-3g/L) imprécise.
Cela est particulièrement visible en cas d’ IgA monoclonale puisque sa bande de migration vers l’anode se confond au même endroit, par exemple, que la bande de la transferrine. La sensibilité peut être améliorée avec l’IFE mais l’IFE n’est pas un test quantitatif. La néphélémétrie est également utilisée pour le dosage des immunoglobulines ; elle est précise même pour de faibles concentrations. Toutefois, les échantillons sériques des patients contiennent également des immunoglobulines polyclonales non-tumorales de type κ et λ qui sont incluses dans l’analyse. Cela signifie que les résultats sont imprécis cliniquement à des concentrations sériques normales.
De plus, le dosage des IgG n’est pas fiable à cause du catabolisme variable des IgG puisque les récepteurs de recyclage FcRn lient l’albumine, l’IgG devenant ainsi saturée ou réduite par chimiothérapie.
Information clinique pour Hevylite®
Les gammes ci-dessous ont été obtenues en mesurant les concentrations en IgA kappa et en IgA lambda de 138 sérums de donneurs sains et sont données à titre indicatif uniquement. Il est fortement recommandé à chaque laboratoire d’établir ses propres gammes.
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Sérum Adulte Normal
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Moyenne
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Médiane
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Gamme 95 Percentile
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IgA kappa (g/L) |
1.24 |
1.19 |
0.48 - 2.82 |
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IgA lambda (g/L) |
1.00 |
0.98 |
0.36 - 1.98 |
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Rapport IgA kappa/IgA lambda |
1.28 |
1.27 |
0.80 - 2.04 |
Des gammes incluant des individus plus âgés, des patients hospitalisés, des patients atteints d’ infections chroniques et des maladies auto-immunes sont nécessaires. Dans les pathologies avec des concentrations en immunoglobulines monoclonales augmentées, des études préliminaires ont indiqué que les rapports κ/λ Hevylite® se maintenaient toujours en limite des gammes obtenues chez les adultes sains de la même manière que ce qui a été observé avec Freelite® et le rapport des chaînes légères libres sériques.
Le suivi avec Hevylite® pour l’obtention rapide d’une information fiable
Comme les études de cas ci-dessous l’indiquent, Hevylite® donne une information sur la rechute plus précocément.
Etude de cas 1
‘Les rapports Hevylite® (IgAκ/IgAλ) (rose), scans densitométriques de l’IgA (rouge) et IgA totale en néphélémétrie (bleu). NR : montre la limite haute de la Gamme Normale.
Lors de sa présentation, ce patient à Myélome Multiple avait 66g/L d’IgA kappa. Le patient a d’abord bien répondu au traitement et reçut une autogreffe de cellules. La concentration en IgA monoclonale (quantifiée par intégration du pic) et le rapport des chaînes lourdes et légères (HLC) montrent clairement une réduction de la paraprotéine. Le rapport est devenu normal 194 jours après que la protéine monoclonale devienne négative en EPS
En utilisant les rapports IgA kappa/IgA lambda, la maladie résiduelle a été visualisée 596 jours avant son identification par EPS.
Etude de cas 2
'Les rapports Hevylite® (IgGκ/IgGλ) (rose), intégration du pic de l’IgA (rouge) et IgG totale en néphélémétrie (bleu). NR : montre la limite haute de la Gamme Normale.'
Un patient à Myélome Multiple à IgG lambda a été suivi au cour de 2 remissions et rechutes. Il illustre les principales caractéristiques des tests HLC. Le rapport HLC a une variation plus étendue que la quantification des IgG par densitométrie ou néphélémétrie. Il est également plus sensible lors des rémissions et indique la rechute plus précocement.
Lors du premier cycle de chimiothérapie (Cyclophosphamide), il y eu un taux significatif de destruction sélective des cellules tumorale, montré par la diminution de l’IgG (par intégration du pic ou néphélémétrie) et du rapport Hevylite®. Suite à une rechute, le patient suit un second cycle de chimiothérapie (C-VAMP), lors duquel les dosages des IgG totales indiquent une réponse. Toutefois, le rapport HLC κ/λ resta inchangé, n’indiquant pas de destruction sélective des cellules tumorales. Malheureusement le patient décéda.
Ceci indique que le rapport HLC a permis l’interprétation du manque de réponse au C-VAMP. Les discordances existantes entre les dosages de l’IgG et les rapports HLC κ/λ, peuvent, en partie, être dues à l’inhibition du récepteur FcRn par la chimiothérapie. Cela causerait une diminution du taux d’IgG totales (à cause du rapide taux de renouvellement) et le rapport HCL κ/λ n’en serait pas affecté.
- A Dispenzieri et al. International Myeloma Working Group guidelines for serum-free light chain analysis in multiple myeloma and related disorders Leukemia 2009; 23:215-224
- Katzmann et al. Screening Panels for Detection of Monoclonal Gammopathies. Clinical Chemistry 2009;55:8:1517-1522
- Tests néphélémétriques séparés pour IgGκ et IgGλ dans l’évaluation des patients à myélome multiple (MM) - A.R. Bradwell et al. (Link to file IgG Poster.pdf)
- Tests néphélémétriques séparés pour IgAκ et IgAλ dans l’évaluation des patients à myélome multiple (MM) - A.R. Bradwell et al. (Link to file IgA Poster.pdf)
- Anomalies des immunoglobulines sériques et des chaînes légères libres dans le lymphone non-Hodgkinien - G. Mead et al.(Link to file MeadA3.pdf)
- Test d’échantillons de 3 patients à myélome multiple à IgA en utilisant un nouveau test pour le dosage de IgA kappa et IgA lambda - C. Margetts et al. (Link to file Margetts.pdf)
AR BradwellSerum Free Light Chain Analysis (Plus Hevylite®) 5 Edition 2008, Chapter 32, p275-285
Le livre est disponible à la vente : 75$ (USA)
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